کلون کردن اپی توپ های خطی پیش بینی شده آنتی ژن تروپومیوزین اکینوکوکوس گرانولوزوس برای لنفوسیت های t در وکتور pegfp-n1 و بررسی بیان آن در رده ی سلولی cho

اکینوکوکوس گرانولوزوس انگلی است که آلودگی با مرحله لاروی آن سبب ایجاد بیماری هیداتیدوزیس در انسان و نشخوارکنندگان می شود؛ تاکنون نزدیک به ده ژنوتیپ از این انگل شناسایی شده است. کشور ایران جزء مناطق با شیوع بالا است، بر این اساس مقابله با این انگل از لحاظ بهداشت جامعه اهمیت خاصی دارد. آنتی ژن های متفاوتی در مراحل مختلف زندگی این انگل بیان می شود، که یکی از آنها تروپومیوزین است. مطالعات پیشین نشان داده که پروتئین نوترکیب ساخته شده بر پایه تروپومیوزین در میزبان اصلی ایمنی قابل توجهی ایجاد کرده است لذا این آنتی ژن می تواند بعنوان یک کاندید مناسب جهت ساخت dna واکسن مورد بررسی قرار گیرد. هدف از این پژوهش پیش بینی و کلون کردن توالی کد کننده اپی توپ های خطی آنتی ژن egtrp گونه اکینوکوکوس گرانولوزوس برای لنفوسیت های t در وکتور pegfp-n1 بود. در این پژوهش اپی توپ های تحریک کننده سیستم ایمنی سلولی میزبان با نرم افزار های بیوانفورماتیک شناسائی و بعد از بهینه سازی کدون ها توالی کد کننده آن سنتز شده و محصول pcr پس از هضم آنزیمی با آنزیم محدود کننده xhoi در وکتور pegfp-n1 کلون گردید، کلنی های مثبت بوسیله pcr colony انتخاب شدند. وکتور های نوترکیب بوسیله ی شوک الکتریکی به سلول های cho ترانسفورم شدند، و بیان پروتئین مورد نظر به صورت فیوژن با پروتئین سبز فلئورسنت توسط میکروسکوپ فلئورسنت مورد بررسی قرار گرفت